分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)核酸或者蛋白樣品濃度zui常用的工具之一。儀器使用頻繁，但甚少見到有人維護(hù)。其實(shí)，保持分光光度計(jì)清潔、無污染是成功操作的關(guān)鍵。Jessica Geisler博士是eppendorf北美地區(qū)負(fù)責(zé)PCR、檢測(cè)和細(xì)胞技術(shù)的產(chǎn)品。她為我們介紹了一些儀器維護(hù)的經(jīng)驗(yàn)。

清潔儀器

我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會(huì)損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無絨棉簽來清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔，那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來加速干燥。

比色皿插槽的蓋子也可以清潔，但不是泡在清潔劑中。如有必要，拆下蓋子，用蘸有溫和清潔劑的軟布或無絨棉簽來清潔。此外，平時(shí)不使用時(shí)，應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子，以免灰塵或其他污染物落入。

消毒和凈化

如果分光光度計(jì)被微生物所污染，那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化。首先，利用溫和的清潔劑來清潔設(shè)備。然后，用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要，拆下并清潔比色皿插槽。

檢查組件

維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometer reference filter kit)，以評(píng)估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長(zhǎng)誤差。試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息，也能提供度的信息，包括平均值和變異系數(shù)。

在測(cè)量準(zhǔn)確性和度時(shí)，將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí)，測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260 nm、280 nm和800 nm)下的吸光度，以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。

zui后，許多分光光度計(jì)，包括Eppendorf的所有儀器，都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢，但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來校驗(yàn)檢測(cè)器，通過檢查zui大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來校驗(yàn)光源。zui后，它還通過測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的度來確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。

遵照這些建議來維護(hù)分光光度計(jì)，那么在今后的使用過程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問題啦。